您好,上海研谨生物科技有限公司!
服务热线:400-665-0203
研谨手机版
石蜡冰冻切片TUNEL凋亡荧光
产品编号:PR0066154
别名  
英文名  
石蜡冰冻切片TUNEL凋亡荧光
提供商:             上海研谨生物
服务名称:          石蜡冰冻切片TUNEL凋亡荧光
规格:               实验服务
周期:             1-2周
价格:             15元
 
收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电详询!
石蜡冰冻切片TUNEL凋亡荧光
 
 
TUNEL凋亡荧光实验原理
dUTP缺口末端标记(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL) 法检测细胞凋亡的原理是当细胞发生凋亡时,DNA内切酶被激活,核小体间的基因组DNA被切断,暴露的3-0H可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidyl Transferase, TdT)加上带有荧光素FITC标记的dUTP,从而可以通过荧光显微镜进行检测。
 
TUNEL凋亡荧光实验意义
1.TUNEL法是一种分子生物学与形态学相结合的研究方法,可对完整的单个凋亡细胞或者凋亡小体进行原位染色,可以准确反映细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征。
2.可用于石蜡切片、冰冻切片、培养的细胞等进行细胞凋亡检测,灵敏度远比一般的组织化学和生物化学方法要高。
3.操作简便快捷,在细胞凋亡的研究中被广泛采用。
 
TUNEL凋亡荧光实验步骤:
1.石蜡切片TUNEL显色法:
①石蜡切片常规脱蜡至水,脱蜡剂= =甲苯,至水剂乙醇;
②PBS漂洗3*5 min; .
③加入蛋白酶K工作液379C反应15-30 min, PBS漂洗3x5 min;
④4%多聚甲醛(pH7 4的PBS)室温固定15-30 min, PBS漂洗3x5 min;
⑤浸入封闭液(3%H202)室温封闭10 min, PBS漂洗3x5 min;
⑥参考使用试剂盒的说明书配制适量的TUNEL检测液,其中含有TdT酶、荧光标记液、TUNEL检测液;
⑦样品上加入适量TUNEL检测液,37°C避光孵育60 min, PBS漂洗3x5 min;
⑧选择是否用DAPI复染细胞核;
⑨使用抗荧光淬灭封片液封片后在荧光显微镜下进行观察。
 
2.冰冻切片TUNEL显色法:
①新鲜组织经处理后,立即在恒冷冰冻切片机内切片,厚度为5~6 um;
②防脱玻片,贴片,室温阴干约12h;③4%多聚甲醛(pH7 .4的PBS)室温固定10 min,
PBS漂洗3x5 min;
④浸入封闭液(3%H20O2) 室温封闭10 min, PBS漂洗3x5 min;
⑤浸入通透液(0.1%Triton X-100溶于PBS中),室温通透30 S-2 min;
⑥参考使用试剂盒的说明书配制适量的TUNEL检测液,其中含有TdT酶、荧光标记液、TUNEL检测液;
⑦样品上加入适量TUNEL检测液,37°C避光孵育60 min, PBS漂洗3x5 min;
⑧选择是否用DAPI复染细胞核:
⑨使用抗荧光淬灭封片液封片后在荧光显微镜下进行观察。
 
结果展示
 
 
 
 
实验完成周期及交付标准
1.实验周期: 1-2周
2.交付标准:蜡块、切片、染色图片.实验报告(实验步骤、试剂、耗材等)
 
需确认的信息
1.样本的种属
2.样本的类型(固定的组织or蜡块or切片)
3.是否提供试剂盒
4.拍照要求
 
从2011年开始我们致力于在生命科学领域、生物医学实验外包及论文润色服务,协助客户各类实验服务及论文润色,是客户您值得信赖的科研合作伙伴!
如果您受时间、试验条件等限制而无法完成您的课题研究,欢迎您与我们联系。
实验代做:
Elisa免费代做 Wb代做 蛋白芯片定制 石蜡冰冻切片
HE染色 透射电镜 扫描电镜服务 免疫共沉淀
流式细胞分选 CCK8检测代做 组织芯片微阵列 免疫细胞化学ICC
荧光染料标记 油红O染色 免疫荧光染色 免疫共沉淀(Co-IP)实验
荧光定量PCR 探针合成 酪蛋白酶谱MMP 免疫组化IHC
激光共聚焦 蛋白双向 蛋白相互作用 课题协助外包
CBA流式多因子 琼脂糖凝胶电泳 疾病模型 药理毒理
研谨手机版
在线客服

微信账号