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细胞培养设备与液体的灭菌

细胞培养设备与液体的灭菌
 
所有培养过程中接触到的设备和试剂都要进行灭菌,灭菌方法的选择主要取决于物品在高温下的稳定性,通常情况下,如果物品可抗高温,如金属,玻璃,耐热的塑料(如PTFE),就可采用干热灭菌法,这是最简单有效的方法之一,这种方法可以使放置的物品的所有部位在灭菌过程中都达到所需的温度.温热灭菌也是一种高效的方法,可应用于热稳定的液体,如水,盐溶液或一些特殊配方的培养基.放射线可用于消毒不耐热的物品,如塑料.由于需要相当高的剂量(25kGy),一般要在中心设备中进行,它也能提供电子波灭菌.乙烯氧化物也可用于不耐热塑料的灭菌,但这种方法会导致乙烯氧化物吸附在塑料表面,需要几天才能挥发释放.还可使用其他化学灭菌剂,包括次氯酸钠和氯仿,但它们更多是作为消除污染的试剂而用于液体和塑料物品的灭菌.氯仿还可用于熏蒸.
不耐热的液体可采用微孔过滤法灭菌.有正压过滤法:如将滤器与相应大小的注射器的出口相连,有总直径大于293mm的内嵌盘状滤器,也有内部有许多皱折,面积大于1000cm2的筒状滤器;还有负压过滤法;将一个真空瓶与滤器相连/负压过滤虽然需要一个真空管或真空泵,但却是一种简单有效的过滤方法,因为过滤后的液体可直接收集至瓶中储存起来.不过负压过滤会导致pH升高,因为溶解在培养基中的CO2会丢失.


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